RIP序列

RIP-Seq简介

RIP-Seq

转录物生命周期的每一个活动,从出生(聚合酶)到降解(核酸酶),都涉及蛋白质结合。除了蛋白质生产外,这些转录物的一个子集在其他重要过程中起着至关重要的作用,如表观遗传调控和转座子沉默的基因组保护。大多数研究都集中在转录组学分析上。然而,据信,mRNAs的水平并不总是与稳态蛋白质水平直接相关。随着人们开始认识到转录后发生的RNA加工和翻译事件的作用,在细胞环境中鉴定与RNA结合蛋白(RBP)相关的RNA的兴趣正在增长。

RIP-Seq maps the sites at which proteins are bound to the RNA within RNA-protein complexes. RNA immunoprecipitation (RIP) implies the purification of RNA–protein interactions in native conditions by using a protein-specific antibody to map the RBP of interest. The advent of sequencing technologies, coupled to various RIP chemistries, has enabled the simultaneous detection of thousand of bound transcripts (mRNAs, non-coding RNAs or viral RNAs) in a single experiment. CD genomics provides RIPed RNA sequencing to obtain insights into not just the well-established processes such as transcription, splicing and translation, but also in newer fields such as RNA interference and gene regulation by non-coding RNAs.

RIP序列工作流程

博凯森生物应用Illumina NGS设备对结合的转录物进行测序,揭示了RBPs的全基因组相互作用。研究人员将提交基于细胞系或组织中特定蛋白质免疫沉淀的适当RIP方法提取的RNA。我们的RIP-Seq服务提供从样品质量控制到数据分析的工作流程,能够快速分析和深入了解RNA。

RIP-Seq Workflow图2:RIP序列工作流程

服务规范

样品要求
  • Fragment sizes: 100 – 800 bp
  • 免疫沉淀RNA>50 ng,浓度>10 ng/ul,OD260/280 1.8-2.0
测序服务 Flexible service options include HiSeq X NextSeq 500
生物信息学分析
  • 原始数据质量控制
  • 对齐和基于TPM/RPKM/FPKM的定量
  • 表情分析
  • 备选拼接分析
  • GO和KEGG注释

可交付成果

  • 原始测序数据
  • 实验结果
  • 数据分析报告
  • 单细胞测序中的详细信息供您写作(定制)

如果您有其他要求或问题,请随时与我们联系。

参考

赵J 通过RIP-seq在全基因组范围内鉴定多梳相关RNA。 分子细胞,2010年12月22日;40(6):939-53

仅供研究使用。不用于诊断程序。
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