桑格测序

桑格测序介绍

桑格测序,也称为“链终止法”,是一种基于DNA聚合酶在体外DNA复制过程中选择性掺入链终止双脱氧核苷酸的DNA测序方法。由两届诺贝尔奖获得者弗雷德里克·桑格和他的同事于1977年开发,因此被称为桑格序列,它是大约40年来使用最广泛的测序方法。

More recently, Sanger sequencing has been replaced by Next-Generation sequencing methods, especially for large-scale, automated genome analyses. However, Sanger remains useful for sequencing single genes or amplicon targets of up to 100 base pairs in length, for projects involving 96 or fewer samples, for microbial identification and gene fragment analysis, and for analyzing short tandem repeats. Moreover, Sanger is considered the “gold standard” sequencing method for validating the sequence of specific genes.

桑格测序也是在各种癌症环境中用于突变检测的最广泛使用的测试平台,因为它提供了对样本材料中所有遗传畸变的全面检查。Sanger测序已被证明可用于评估手术切除的病理标本中癌基因和肿瘤抑制基因中是否存在复发性单核苷酸突变或小插入/缺失。

The Sanger (chain-termination) method for DNA sequencing DNA测序的Sanger(链终止)方法

应用

  • HSP(发夹、茎环、回文)用于有问题的模板
  • 碎片分析应用程序
  • 微卫星
  • AFLP(扩增片段长度多态性)
  • 单核苷酸多态性与突变检测
  • 染色体插入和缺失(INDEL)
  • 16S微生物鉴定
  • 定义肿瘤的突变谱
  • 识别诊断测试中的宪法变体

主要特征和优势

  • 高质量-DNA测序读取长度高达~800个碱基
  • 训练有素的技术支持我们的团队提供准确可靠的数据
  • 快速周转时间
  • 低成本
  • 免费咨询和故障排除

项目工作流程

  • 质粒提取/PCR产物纯化
  • 量化
  • 测序服务
  • 序列分析

服务规范

样品要求
  • PCR Products (purified or not): ≥ 20 ng/µL
  • Plasmids(< 10 kb): ≥ 100 ng/µL
  • Plasmids(>10 kb): ≥ 500 ng/µL
  • DNA片段(如凝胶分离片段):30 ng/ul
  • 大DNA(BAC,细菌基因组):ug/ul
  • Minimum volume of 15 µL; 10 ul per reaction
测序服务策略
  • Applied Biosystems DNA测序仪(3730 XL型测序仪)
  • 一次测序(一个模板,一个引物)通常会产生800-1000个核苷酸的高质量序列数据
数据传输
  • 结果以两种形式返回:
  • 原始序列文件(.seq文件)
  • 原始跟踪(.ab1文件)

十多年的桑格测序经验使博凯森生物成为您DNA测序项目最值得信赖的公司。通过短交付时间和个性化客户支持获得高标准的结果。我们训练有素的技术支持为您提供市场上最好的服务。如果您有其他要求或问题,请随时与我们联系。

仅供研究使用。不用于诊断程序。
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